Нитроцелулозните мембрани са популярна матрица, използвана при белтъчно блотинг поради техния висок афинитет на свързване с протеини, съвместимост с различни методи за откриване (хемилуминесценция, хромогенност и флуоресценция), и способността за обездвижване на протеини, гликопротеини или нуклеинови киселини.
Защо използваме нитроцелулоза?
Нитроцелулозно стъкло, нитроцелулозна мембрана или нитроцелулозна хартия е лепкава мембрана, използвана за имобилизиране на нуклеинови киселини в южните и северните петна Използва се и за имобилизиране на протеини в западните петна и атомно-силова микроскопия за неговия неспецифичен афинитет към аминокиселини.
Защо PVDF се използва в Western blotting?
Western blotting с помощта на мембрани от поливинилиден дифлуорид (PVDF) е една от най-популярните техники за откриване и характеризиране на протеини. Ако тази техника се комбинира с имунооткриване, поведението на конкретен протеин може да се изясни.
Нитроцелулозната мембрана хидрофобна ли е?
За разлика от полиакриламида, нитроцелулозата осигурява подходяща подкрепа за последващо оцветяване на протеини или имунохимично характеризиране. Свързването с нитроцелулозата се медиира предимно от хидрофобно взаимодействие (Schneider, 1980), въпреки че могат да бъдат включени и електростатични сили (Farrah et al., 1981.
Кое е по-добро нитроцелулоза или PVDF?
Докато нитроцелулозата е крехка и крехка, PVDF е по-издръжлива и има по-висока химическа устойчивост, което я прави идеална за повторно изследване и секвениране. Нитроцелулозата може да се окаже трудна за отстраняване и повторно изследване без загуба на сигнал.