Може да се замрази и да се размрази RIPA буфера 2-3 пъти, без да губи ефикасността му, докато се съхранява на лед по време на употреба (20-30 минути). Съхранявайте буфера замразен при -80 градуса C.
Колко дълго мога да запазя RIPA буфер?
1. Ако буферът ще се използва непрекъснато, се препоръчва 10x буферът да се съхранява при 4°C за 1-2 седмици. За по-дълги периоди от време буферът трябва да се съхранява при -20°C. Препоръчва се аликвотиране на 10x буфер, ако трябва да се извършат много малки експерименти.
Може ли RIPA буфер да се съхранява на?
Приготвеният RIPA буфер трябва да се раздели на аликвотни части и да се съхранява при −20°C. Добавете протеазни и/или фосфатазни инхибитори към размразена аликвотна част преди незабавна употреба. Един милилитър буфер е достатъчен за лизиране на приблизително 5 милиона клетки. …
Как съхранявате RIPA лизати?
Използвайте готови лизати възможно най-бързо и съхранявайте за възможно най-кратко време. Съхранявайте лизатите при -80℃ колкото е възможно по-дълго. За лизати, които ще трябва да се съхраняват дълго време, прехвърлете прясно приготвените епруветки в наличен фризер при -80℃, за да предотвратите разграждането.
Как размразявате RIPA буфера?
След отстраняване на крайния разтвор за промиване от клетките, добавете подходящ обем RIPA буфер (1 ml на 0,5 до 5 × 107 клетки) към клетъчната пелета и разбъркайте или разбъркайте за кратко, за да ресуспендирате напълно клетките. Инкубирайте върху лед или в хладилник (2–8 °C) за пет минути.