Вортексирането няма да откъсне вашата РНК, за да я направи неизползваема, ако правите произволна първична RT - само ако искате да клонирате дълга иРНК. Техническата поддръжка на Invitrogen също е правилна. Хлороформът е по-тежък от Тризол и ще потъне до дъното на епруветката.
Безопасно ли е завихрянето на РНК?
Не правете вортекс лизатите на Тризол или РНК проби, за да избегнете срязване. След екстракция дръжте РНК пробите на лед през цялото време. Този протокол е предназначен за проби, лизирани от 1 ml Trizol в епруветка от 1,5 или 2 ml.
Можете ли да затоплите РНК?
Затова избягвайте високи температури ( над +65°C), тъй като те засягат целостта на РНК. Вместо това, за да разтопите вторичните структури, загрейте РНК до +65°C за 15 минути в присъствието на денатуриращи буфери.
Как ресуспендирате РНК пелети?
ресуспендирайте вашата пелета с топла вода (40-50°C). инкубира се при 45°C за 10 минути. поставете ги в +4 за 4-6 часа.
Как утаявате РНК?
A.
След като концентрацията на солта е коригирана, РНК може да се утаи чрез добавяне на 2,5 обема етанол или 1 обем изопропанол и внимателно разбъркване, последвано от охлаждане за поне 15 минути при -20° C.
