Съдържание:
- Следва преглед на различните стъпки на протокола за индиректно имунофлуоресцентно оцветяване
- Как извършвате имунофлуоресценция?
- Как използвате имунофлуоресценция в клетка?
- Какъв е примерът за имунофлуоресценция?
- Каква е употребата на имунофлуоресцентно оцветяване?
Видео: Как се прави имунофлуоресценция?
2024 Автор: Fiona Howard | [email protected]. Последно модифициран: 2024-01-10 06:34
Следва преглед на различните стъпки на протокола за индиректно имунофлуоресцентно оцветяване
- Планиране на експеримента и подготовка на пробите. …
- Фиксиране на проба. …
- Клетъчна пермеабилизация. …
- Блокиране. …
- Първична инкубация на антитела. …
- Вторична инкубация на антитела. …
- Противопоставяне и монтаж.
Как извършвате имунофлуоресценция?
Всички стъпки на инкубация се извършват при стайна температура
- Измийте клетките два пъти и използвайте пинсети, за да поставите внимателно покривното стъкло с обърнати нагоре клетки във овлажнената камера.
- Фиксирайте с 4% формалдехид за 10 минути и измийте 3 ×.
- Пропускайте с 0,1 % TX-100/PBS за 15–20 минути и измийте 3 ×.
Как използвате имунофлуоресценция в клетка?
Протокол за имунофлуоресценция за прилепнали клетки
- Посева 1–1,5 x104 клетки на ямка на 4-камерно предметно стъкло в 500 mL културална среда. Инкубирайте при 37°C при 5% CO2.
- 32–36 часа след клетъчното засяване, отстранете средата за клетъчна култура и изплакнете клетките 3 пъти с 500 µL 1X PBS.
Какъв е примерът за имунофлуоресценция?
Например, изследовател може да създаде първични антитела в коза, които разпознават няколко антигена, и след това да използва свързани с багрилото вторични антитела на заек, които разпознават константната област на козе антитяло (" заешки анти-кози" антитела).
Каква е употребата на имунофлуоресцентно оцветяване?
Имунофлуоресцентното (IF) оцветяване е широко използвана техника в биологичните изследвания и клиничната диагностика IF използва флуоресцентно белязани антитела, за да открие специфични целеви антигени. Следвано от изображения, това е много директна техника, тъй като всъщност можете да видите нещо.
Препоръчано:
Как се прави флебектомия?
Изработват се в кожата до разширената вена. Лекарят вкарва куката за флебектомия под повърхността на кожата и премахва разширените вени през малкия разрез. Тази процедура обикновено отнема между 30 минути и един час . Как се прави амбулаторна флебектомия?
Как се прави процес на интубация?
Устата на пациента е внимателно отворена и с помощта на осветен инструмент, за да държи езика извън пътя и да освети гърлото, тръбата се насочва внимателно в гърлото и напредва в дихателните пътища. Около тръбата има малък балон, който се надува, за да държи тръбата на място и да предпази въздуха от излизане .
Как се прави кариотипиране за генетично изследване?
Тестът за кариотип използва кръв или телесни течности за анализ на вашите хромозоми. Хромозомите са частите от нашите клетки, които съдържат гени, които се състоят от ДНК. Вие наследявате гени от родителите си. Гените определят вашите черти, като цвят на очите и кожата .
Как складът прави пари?
Може би най-бързият и очевиден начин да печелите от празния си склад е да го отдадете под наем на компания. Много индустрии могат да използват големи открити пространства, като производствени фирми, пивоварни за бира или дори складови, логистични или дистрибуторски компании .
Как да намалим фоновото оцветяване при имунофлуоресценция?
За да се намали неспецифичното свързване на антитела и в резултат на това да се намали фоновият сигнал, се препоръчва използване на блокиращ разтвор преди инкубация с антитела Най-ефективният блокиращ разтвор ще да е този, съдържащ серум от същия вид, в който е повдигнато вторичното антитяло .
